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          一氧化氮檢測試劑盒的樣品處理方法

          發布時間:2023-01-23 點擊次數:284次
            一氧化氮檢測試劑盒適合于檢測細胞內的一氧化氮水平,可以進行實時檢測。如果收集細胞后再裝載探針,通常至少可以檢測100個樣品。
            采用改進格里斯法將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽后,準確測定NO的量。格里斯分析機理為重氮類之間的偶氮耦合,重氮類是由磺胺和NO2-和N-(1-萘基)乙二胺二丨鹽丨酸丨鹽產生的,產生與NO代謝物成正比的比色(540 nm)產物。NO在體內或水溶液中易氧化生成NO2—,在酸性條件下,NO2—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進一步與萘基乙烯基二胺偶合,產物在550nm處有特征吸收峰,測定其吸光值,可以計算NO含量。
            樣品處理方法:
            1.組織:按照組織質量(克):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1克組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿。10000克,4℃離心15分鐘,取上清,置冰上待測。
            2.細菌、真菌:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3分鐘);然后10000克,4℃,離心15分鐘,取上清置于冰上待測。
            3.體液和培養液等其它液態樣品:直接測定。

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          021-65672052
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